生物樣本前處理解決方案

臨床手術(shù)取下的生物樣本灌注福爾馬林后，經(jīng)過醫(yī)護人員的運送，運至病理科，再由病理科人員進行登記錄入，隨后進行取材，后將剩余生物樣本進行至少1月的留存。

在轉(zhuǎn)移過程中可能會出現(xiàn)以下幾點風(fēng)險： 

樣本信息丟失：固定時間不可控，如固定不充分，深部區(qū)域持續(xù)發(fā)生降解

醫(yī)護人員受到污染：灌注福爾馬林及轉(zhuǎn)運過程中福爾馬林的揮發(fā)與外溢

樣本轉(zhuǎn)移運輸困難：福爾馬林桶很沉難以運輸

新鮮樣本轉(zhuǎn)送難題：要求快速處理，且有污染風(fēng)險

歐盟第895/2014號規(guī)定(2014年8月14日發(fā)布) (EC) 第1907/2006號修正XIV：歐洲議會和理事會關(guān)于化學(xué)品登記、評估、授權(quán)和限制的條例：甲醛，與苯胺的低聚物反應(yīng)產(chǎn)物(技術(shù)MDA)符合致癌分類標(biāo)準(zhǔn)(1B類) 。

目前上已經(jīng)對有毒性的固定液福爾馬林使用進行限制，為了確保整個生物樣本處理過程中操作者的安全，很有必要在密封的環(huán)節(jié)下使用固定液。且生物樣本的安全性對醫(yī)生、患者及科室都是重中之重，需要對樣本的追溯，從樣本轉(zhuǎn)移的整個流程進行監(jiān)控，從而確保生物樣本的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)化。

樣本真空系統(tǒng)，使得保存真空密封的“新鮮”樣本第*次成為可能，即是使用福爾馬林也可其與醫(yī)護患者的直接接觸，消除外科手術(shù)室中一級致癌物福爾馬林對醫(yī)護人員的健康危害，并能夠持續(xù)監(jiān)測樣本從外科手術(shù)室到病理科的溫度和時間，全流程可追溯，提升樣本的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)化，在4°C溫度下可保存72h不改變樣本生物學(xué)特性，并已經(jīng)在歐美臨床廣泛使用。
    對于不同類型、大小的組織樣本，采用抽真空（真空度可調(diào)）的方式密封樣本，使組織減少和空氣的接觸，密封在不同的專用樣本袋中，保持樣本的原始性、真實性。真空密封后，降低組織的自溶率，組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存更加完好。新鮮樣本的原始信息得到保留的同時，有利于控制固定時間，有利于免疫組化、分子生物學(xué)研究、組織標(biāo)本庫的建立，保證樣本的信息完整性。

下面為生物樣本在運送與保存時的改善：
 

規(guī)范性

通過質(zhì)量比控制使用福爾馬林的量，可也選擇不使用福爾馬林

規(guī)范轉(zhuǎn)移流程，記錄數(shù)據(jù)，使得所有樣本可追溯

利于控制固定時間，利于IHC和分子研究

安全性

規(guī)范福爾馬林的應(yīng)用，降低與一級致癌物的接觸，保障醫(yī)護人員安全

真空密封后,沒有福爾馬林揮發(fā)與外溢，保障樣本安全

降低與空氣接觸，降低自溶率，保持樣本原始信息

取材后留存剩余樣本，保障樣本存儲及醫(yī)院環(huán)保安全

經(jīng)濟性

樣本袋密封后減少了空間，降低了醫(yī)療廢棄物處理成本

減少福爾馬林使用,降低廢液處理成本

便捷性

儲存在密封樣本袋中,更加節(jié)約空間

也可以不放福爾馬林直接密封儲存

近年來，歐洲和美國的醫(yī)院開始陸續(xù)采用這一創(chuàng)新平臺，發(fā)表的專著眾多，摘錄如下幾篇具有代表性的文章和大家分析。各個方面的研究表明：在組織學(xué)、生物標(biāo)記物和核酸方面，真空低溫保存樣本都能夠有效保存樣本的生物學(xué)信息，對于組織庫、外科臨床、病理科和患者都能帶來莫大的益處。

1. 真空4℃保存72-168個小時的前列腺組織中的RIN與開始時間相比較，高達93-87%的信息都被有效保存。

2. 周五下午進行手術(shù)獲得的樣本真空4℃保存至周一操作，其和周一至周四手術(shù)樣本得到同樣的對待，有效保證了患者的權(quán)益。

3. 外科手術(shù)室中護士血液中的15-F2t-異脯氨酸和丙二醛的水平較高, 生物標(biāo)記物分析證實空氣中甲醛對氧化應(yīng)激的發(fā)生有直接作用，使用真空密封技術(shù)能夠顯著減少暴露危險。

4. 組織質(zhì)量指數(shù)(TQI)：一種內(nèi)在的控制，它可以在定量測量少數(shù)選定的信息表位的基礎(chǔ)上，對蛋白質(zhì)狀況進行全面評估。 對pHSP 27、細(xì)胞角蛋白和pERK 1/2的定量和TQI的計算表明，通過低溫真空密封和儲存，可以更好地保存組織。 

5. 真空低溫可保存組織標(biāo)本進行組織學(xué)、轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)組學(xué)檢查，長可達48小時甚至更長。

6. 低氧張力是干細(xì)胞微環(huán)境的重要組成部分，真空條件下組織樣本的缺氧狀態(tài)可能使未分化的干細(xì)胞/祖細(xì)胞存活。

7.  腫瘤的原代組織培養(yǎng)中細(xì)胞活力在24個小時后還可達89.3%。

 參考文獻：

1. Vacuum Sealing for a Safe Transfer of Tissue from Operation Theatre to Laboratory Using TissueSAFE Milestone Apparatus. Isidro-Marron P¹; Vallina-Alvarez A²; Montoya-Sanchez A²; Astudillo-Gonzalez, A². 

采用Milestone的TissueSAFE設(shè)備進行真空密封把組織從外科手術(shù)室轉(zhuǎn)移到實驗室。

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組織轉(zhuǎn)移到病理實驗室：在真空下的一種替代福爾馬林的安全選擇。

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基于真空的保存外科標(biāo)本的方法：環(huán)保安全，邁向無甲醛實驗室。

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面向無福爾馬林的醫(yī)院-手術(shù)室護士暴露在甲醛中的15-F2t-異脯氨酸和丙二醛的水平。  

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真空密封、無福爾馬林組織保存和運輸系統(tǒng)的組織學(xué)驗證。

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近期癌癥診斷中病理樣本的前處理。

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組織質(zhì)量指數(shù)：測定前處理變量對FFPE組織影響的內(nèi)在控制。

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真空下組織封閉冷卻技術(shù)在腫瘤組織組學(xué)分析中的應(yīng)用。

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真空保存組織標(biāo)本中干細(xì)胞的有效分離。

10. A Collection of Primary Tissue Cultures of Tumors from Vacuum Packed and Cooled Surgical Specimens: A Feasibility Study. Laura Annaratone, Caterina Marchio, Rosalia Russo, Luigi Ciardo, Sandra Milena Rondon-lagos, Margherita Goia, Maria Stella Scalzo, Stefania Bolla, Isabella Cassellano, Ludovica Verdum di Cantogno, Gianni Bussolati, Anna Sapino. PLOS September 2013,Volume 8, Issue 9, e75193. 

從真空包裝和冷卻的外科標(biāo)本中收集腫瘤的原代組織培養(yǎng)物：一項可行性研究。

樣本真空系統(tǒng)，可以有效的消除醫(yī)護人員與一級致癌物的接觸，并能*大化保護生物樣本安全，所謂危難時刻見真情，中國的醫(yī)護人員都是逆風(fēng)而上的英雄，為了守護人民的安全不斷在危難時刻挺身而出，不僅是因為“健康所系，性命相托”的誓言與責(zé)任，更是為了“大家”與“小家”扛起了責(zé)任，在被他們守護的時候，他們同時也需要被我們守護，關(guān)注醫(yī)生健康，關(guān)注每一個風(fēng)險環(huán)節(jié)，愿所有醫(yī)生能得到信任與愛護！

中國醫(yī)生平凡而偉大，中國加油，武漢加油！