前言
克百威是高效而廣譜的殺蟲農(nóng)藥,進(jìn)入環(huán)境后,在環(huán)境中殘留時間長,在土壤中的半衰期為30~120d,其中沙土中為30d,肥沃土壤中40d,泥中為80d,由于其在水中溶解性較強(qiáng),可隨水體流動而造成污染擴(kuò)散。該農(nóng)藥對鳥類毒性非常強(qiáng),長期大面積使用會對濕地鳥類造成嚴(yán)重威脅。人體接觸被污染的環(huán)境或食用被污染的食品和水源會導(dǎo)致慢性中毒。
本文參照《蜂產(chǎn)品中克百威殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(征求意見稿)》,利用EZsep™QuEChERS(6gMgSO4、1.5gNaCl, 貨號:PZ13059)和EZsep™QuEChERS(50mgPSA、50mgC18、150mg MgSO4, 貨號:PZ13005)凈化樣品,再通過高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測進(jìn)行檢測,建立了一種對蜂產(chǎn)品中克百威殘留量的分析方法。
1、 實(shí)驗(yàn)過程
1.1 儀器與試劑
EZsep™QuEChERS(50mgPSA、50mg C18、150mgMgSO4,貨號:PZ13005),北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;
EZsep™QuEChERS(6gMgSO4、1.5 gNaCl,貨號:PZ13059),北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;
4500質(zhì)譜系統(tǒng),SCIEX公司;
EZsep™ MAX固相萃取柱(60 mg/3mL,貨號:PZ12802),北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;
冷凍離心機(jī),GL-20G-Ⅱ,上海安亭科學(xué)儀器廠;
乙腈(色譜純),購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司;
甲酸、乙酸、乙酸胺、氯化鈉、無水硫酸鎂等化學(xué)品均為分析純或以上,購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;
1.2 工作液配制
51種農(nóng)藥混標(biāo):10μg/mL,溶劑為乙腈,購自壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。
51種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)使用液:移取51種農(nóng)藥混標(biāo)0.1mL,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為100ng/mL的51種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)使液。依次移取100ng/mL的51種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)使用液0.01、0.02、0.05、0.1、0.2mL,分別置于10mL容量瓶中用甲醇定容至刻度,得到濃度依次為0.1μg/L、0.2μg/L、0.5μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液。
1.3 實(shí)驗(yàn)部分
1.3.1 樣品制備
取蜂蜜試樣2g,置于50mL聚丙烯離心管中,加入10mL水、渦旋30s混勻后靜置10 min,加入5mL1%乙酸乙腈溶液,渦旋提取3min,加入EZsep™QuEChERS(6gMgSO4、1.5gNaCl,貨號:PZ13059) 后立即手動劇烈振搖1min,隨后以5000r/min離心5min,取上清液1.0mL待凈化。
1.3.2 固相萃取凈化取
1.3.1待凈化液于裝有EZsep™ QuEChERS(50mgPSA、50mgC18、150mg MgSO4,貨號:PZ13005)的2mL離心管中,渦旋混勻30s后以5000r/min離心5min,吸取上清液0.5mL與0.5mL水渦旋混勻,經(jīng)0.22um濾膜過濾至進(jìn)樣小瓶,供LC-MS/MS測定。1.3.1 LC-MS/MS儀器條件色譜柱:Shim-pack Velox C18(2.7μm,2.1*100mm);柱溫:40℃;檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)測(MRM);流動相:A:0.1%甲酸-5mmol/L乙酸銨水溶液;B:乙腈;流速:0.4mL/min;進(jìn)樣量:2μL。
表1 流動相梯度洗脫表
2、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表2 加標(biāo)回收率
圖1 標(biāo)液色譜圖
圖2克百威標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
圖2 3-羥基克百威標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
3、 實(shí)驗(yàn)結(jié)論
本實(shí)驗(yàn)使用EZsep™QuEChERS(6gMgSO4、1.5gNaCl,貨號:PZ13059)和EZsep™QuEChERS(50mgPSA、50mgC18、150mg MgSO4,貨號:PZ13005)對蜂產(chǎn)品中克百威進(jìn)行凈化,再通過高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行測定,該方法的加標(biāo)回收率在94.2%~102.8%之間,RSD為1.4%~ 3.2%,滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。測試結(jié)果說明EZsep™QuEChERS產(chǎn)品能很好的完成方法中的凈化工作,并且結(jié)果穩(wěn)定、可靠。
4、 參考文獻(xiàn)
[1] 《蜂產(chǎn)品中克百威殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 (征求意見稿)》